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技術文章

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膜通透性檢測

更新時間:2020-04-30點擊次數:2433

腸道細菌及其毒素的移位可能是自身免疫性疾病發病的重要因素。這種猜測在一段時間內被認為是正確的。但是由于沒有合適的研究工具,因此沒有得到廣泛研究。事實上,研究表明壓力、手術和輕微胃腸道疾病等顯著增加了黏膜通透性。因此,這種情況下顯著增加了細菌從腸黏膜進入人體的機率。

Chondrex公司提供FITC標記的右旋糖苷及D-木糖檢測試劑盒用于評估體內和體外大分子對半透膜的通透性。

通透性評估試劑盒

貨號

中文名稱

英文名稱

規格

6601

D-木糖檢測試劑盒

D-Xylose Assay Kit     

1Kit

通透性評估試劑-熒光標記的右旋糖苷

貨號

中文名稱

英文名稱

分子量

規格

4013

FITC標記的右旋糖苷

FITC-Dextran

4 kDa

425 mg/ml x 5 ml

4009

FITC標記的右旋糖苷

FITC-Dextran

40 kDa

25 mg/ml x 5 ml

4014

FITC標記的右旋糖苷

FITC-Dextran

70 kDa

25 mg/ml x 5 ml

一般來說,分子通過腸道進入身體發生在細胞間或通過細胞進入體內。熒光標記的右旋糖苷提供了簡單,可靠的方法用于評估體外或體內細胞旁通透性。另一種方法是,通過D-木糖測定跨細胞通透性,也就是說通過D-木糖作為被動載體介導小腸吸收。

FITC-標記的右旋糖苷

一些研究表明壓力、手術和輕微胃腸道疾病等顯著增加了黏膜通透性。熒光標記的右旋糖苷提供了簡單,可靠的方法用于評估半透膜功能。關于FITC-標記的右旋糖苷的分子量,( 40kDa),有研究表明在大腸桿菌中大多數蛋白分子量為25-120kDa,這表明具有生物學意義的蛋白質在該范圍內。因此Chondrex提供40kDa FITC-右旋糖苷作為相關大分子標記物,用于體外或體內半透膜通透性研究。

檢測流程:

1)飼喂前和實驗過程中,禁食4小時。

2)口服40 kDa FITC-Dextran (10 mg/250 µl/mouse)

33小時后,收集血漿。

41:2 (或更大)PBS稀釋血漿

5)取50-100ul上去到96孔板。讀取熒光值:Ex: 490 nm  Em: 530 nm

     PBS稀釋的FITC- 右旋糖苷繪制的標準曲線

 

參考文獻:

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