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技術(shù)文章

當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章GMP級干細(xì)胞細(xì)胞凍存液 Cryopreservation Media

GMP級干細(xì)胞細(xì)胞凍存液 Cryopreservation Media

更新時間:2020-07-03點擊次數(shù):3564

產(chǎn)品描述:

STEM-CELLBANKER ®GMP下生產(chǎn)的ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品特點是化學(xué)成分清晰,無動物源成分,專門針對ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞特點設(shè)計的細(xì)胞凍存液。STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動物源性成分的,所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求,是干細(xì)胞治療和應(yīng)用合適的細(xì)胞凍存液,STEM-CELLBANKER ®使用方便,不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實現(xiàn)干細(xì)胞高存活率的凍存和長達(dá)10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細(xì)胞活力,同時保持細(xì)胞多能性,和細(xì)胞的正常核型和增殖能力,是一般凍存液無法達(dá)到的。

產(chǎn)品特點:

1)化學(xué)成分清楚和無動物源成分

2)按照日本,歐盟,美國和PIC/SGMP指南生產(chǎn)

3)復(fù)蘇后保持細(xì)胞的高活力

4)解凍復(fù)蘇后依然保持干細(xì)胞的多能性

5)實現(xiàn)細(xì)胞的長期凍存,不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

6)可以不需要液氮就可以長期保存

7)同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細(xì)胞凍存

8STEM-CELLBANKER 已經(jīng)得到美國食品藥物管理局的認(rèn)證(生物制品評價和研究中心)

STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動物源性成分的,所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求,是干細(xì)胞治療和應(yīng)用合適的細(xì)胞凍存液,STEM-CELLBANKER ®使用方便,不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實現(xiàn)干細(xì)胞高存活率的凍存和長達(dá)10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細(xì)胞活力,同時保持細(xì)胞多能性,和細(xì)胞的正常核型和增殖能力,是一般凍存液無法達(dá)到的。

應(yīng)用實例:

1 STEM-CELLBANKER對人體胚胎干細(xì)胞(hESC 和誘導(dǎo)多能(iPS)干細(xì)胞進(jìn)行凍存測試

測試凍存液:STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規(guī)細(xì)胞凍存液(細(xì)胞培養(yǎng)基 + 10% DMSO + 血清代替品)

細(xì)胞存活率評估方法:trypan Blue Live/Dead assay kit試劑盒

測試結(jié)果:使用STEM-CELLBANKER凍存液的細(xì)胞存活率明顯提高,HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達(dá)93%、96% 和90%,比只有50%存活率的常規(guī)細(xì)胞凍存液高一倍。同時,結(jié)果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細(xì)胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10%福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKERø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10%福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用HE或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中,壞死或細(xì)胞凋亡的跡象都可以忽略不計。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結(jié)果。

3.RNA從小鼠肺成纖維細(xì)胞系的任收獲后立即或在-80STEM-CELLBANKER凍存后的細(xì)胞中提取ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個樣品中的mRNA水平,結(jié)果顯示93%的mRNA在±1.6倍差異的范圍內(nèi)。

細(xì)胞株:129SV (Mouse ES cell)

測試凍存液:ZENOAQ 產(chǎn)品(CELLBANKER 1, 1plus, 2 STEM-CELLBANKER

常規(guī)自培凍存液(90% FBS+10%DMSO 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖:

使用手冊:

細(xì)胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數(shù)生長數(shù)的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1. 按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。

2. 按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。

(參考:5×105 5×106 cells/ml

3. 取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm4℃,35)。移去離心管中的上清液。

4. 加入適量的CELLBANKER? 細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為 5×105 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。

5. 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。

6. 直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。

7. 若研究者需要液氮保存時,可將*凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:

1. 從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37 振動水浴槽中快速解凍。

2. 待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。

3. 離心收集培養(yǎng)細(xì)胞((參考離心條件:1,000~2,000rpm4℃,35),移去上清液。

4. 清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。

5. 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。

6. 鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

儲存方法和保質(zhì)期

儲存于4℃以下。 保質(zhì)期3年。3個月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計劃時,盡可冷凍保存。為避免重復(fù)凍結(jié)-解凍過程可能導(dǎo)致的CELLBANKER品質(zhì)下降和性能降低,推薦將 100mL 產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于 4℃以下或-20℃冰箱凍存。

質(zhì)量保障承諾

1. STEM-CELLBANKER 細(xì)胞凍存液經(jīng)過嚴(yán)格內(nèi)毒素、pH、滲透壓和微生物檢查,確保產(chǎn)品不含細(xì)菌、霉菌以及支原體。

2. 使用小鼠胚胎干細(xì)胞(Mouse ES Cells)、Jurkat 和SK-007細(xì)胞驗證性能測試凍存細(xì)保存活率達(dá)80%以上。

檢測項目

檢測結(jié)果

內(nèi)毒素(Endotoxin

小于20EU/ml

支原體(Mycoplasma

pH

7.0-8.5

容量滲透壓(Osmolarity)

低于1800 mOsm

微生物檢查(Sterility)

注意事項

1) CELLBANKER系列產(chǎn)品只供實驗室研究使用,是試劑級產(chǎn)品。

2)我們推薦用戶在使用本產(chǎn)品之前,事先對所使用的細(xì)胞進(jìn)行至少為期 1 周的

試驗性細(xì)胞冷凍保存培養(yǎng)。確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。

免責(zé)聲明本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。

產(chǎn)品訂購:

中文名稱

英文名稱

貨號

規(guī)格

無血清型細(xì)胞凍存液

Cellbanker2

11891

100ml

無血清型細(xì)胞凍存液

Cellbanker2

11892

20ml

GMP級干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker GMP grade

11890

100ml

GMP級干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker GMP grade

11897

20ml

GMP級干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker GMP grade

11894

4x20ml

DMSO干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker DMSO Free GMP grade

11890F

100ml

DMSO干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker DMSO Free GMP grade

11897F

20ml

(現(xiàn)貨)

DMSO干細(xì)胞凍存液

Stem-Cellbanker DMSO Free GMP grade

11894F

4x20ml

(現(xiàn)貨)

無血清型細(xì)胞清洗液

Cellotion

11898

100ml

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