EAE模型操作流程

一、實(shí)驗(yàn)試劑：

二、實(shí)驗(yàn)耗材：
1）無菌陶瓷研缽1個(gè)
2）5ml玻璃注射器
3）振蕩器
4）28G一次性注射針頭
5）18G一次性注射針頭
6）1ml一次性注射器
7）一次性三通管1個(gè)
8）一次性塑料試管
三、實(shí)驗(yàn)周期：約2周
四、試劑配制：
1.少突膠質(zhì)細(xì)胞髓磷脂糖蛋白（MOG）準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備*弗氏佐劑（CFA）：結(jié)核菌素（Mtb）粉末溶于不*弗氏佐劑而成（終濃度為4mg/ml）。將100mg結(jié)核菌素粉末與不*弗氏佐劑混合，每次加入一點(diǎn)點(diǎn)不*弗氏佐劑，在研缽中充分研磨保證結(jié)核菌素*懸浮。
PS:也可直接購買即用型的*佐劑（Chondrex cat#7001 4mg/ml ,購自北京博蕾德生物科技有限公司）
2）MOG35-35：即用型-20℃保存。
3）1:1混合MOG和Mtb/CFA（終濃度為1mg/ml）。使用三通管使之混合和乳化，保存于4℃冰箱，并于24小時(shí)內(nèi)使用
2、百日咳毒素（PTX）：50μg毒素和500μl PBS做成濃度為100μg/ml體系，保存于4℃冰箱。使用時(shí)按1:100稀釋（終濃度為1μg/ml），腹腔注射200μl/只小鼠
五、步驟：
1、*天：小鼠胸腹部皮下注射接種MOG和Mtb/CFA（終濃度為1mg/ml）混合液：腹側(cè)2-4個(gè)點(diǎn)，共150μl/只。再腹腔注射百日咳毒素（PTX），200μl/只小鼠
2、第三天：腹腔內(nèi)注射百日咳毒素（PTX），200μl/只小鼠。

以上EAE模型-(制備全套試劑，北京博蕾德均有現(xiàn)貨庫存。歡迎咨詢。

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