小鼠NGAL檢測(cè)試劑盒

Mouse NGAL ELISA Kit

簡(jiǎn)介：

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）屬于脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族2。這類分泌型蛋白的特征在于：1) 能夠通過β折疊片形成的結(jié)構(gòu)保守口袋結(jié)合疏水性小分子；2) 可與特定細(xì)胞表面受體結(jié)合；iii) 能形成大分子復(fù)合物。NGAL擁有多個(gè)同義名稱：廣為使用的當(dāng)屬脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2（LCN 2）；近期學(xué)界采用鐵載體蛋白（siderocalin）這一名稱以凸顯NGAL結(jié)合細(xì)菌鐵載體的功能3。在小鼠中，NGAL最初以mRNA形式被鑒定為24p，隨后又以24kDa超誘導(dǎo)蛋白（SIP24）或子宮運(yùn)載蛋白（uterocalin）等名稱被研究。

小鼠NGAL由含單個(gè)二硫鍵的180個(gè)氨基酸殘基多肽鏈構(gòu)成，計(jì)算分子量為20.9 kDa，但糖基化修飾使其在SDS-PAGE中的表觀分子量增至24 kDa。在某些生理情況下，小鼠NGAL可與基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）共表達(dá)并形成復(fù)合物，但該復(fù)合物的連接機(jī)制尚不明確，因?yàn)樾∈?/span>NGAL不同于人類同源蛋白，其缺乏能形成分子間二硫鍵的第三個(gè)半胱氨酸殘基。在成年小鼠體內(nèi)，NGAL表達(dá)于中性粒細(xì)胞、子宮腔上皮和腺上皮細(xì)胞?，以及肺、脾臟、陰道和附睪中。在胚胎發(fā)育階段及響應(yīng)多種刺激時(shí)，NGAL可能在其他細(xì)胞類型中表達(dá)，例如特定腎細(xì)胞、LPS刺激的巨噬細(xì)胞11、地塞米松誘導(dǎo)的L細(xì)胞，以及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子活化的成纖維細(xì)胞。此外，小鼠NGAL屬于1型急性期蛋白，在體內(nèi)松節(jié)油炎癥模型或體外TNF-α/地塞米松刺激下，肝細(xì)胞可分泌該蛋白。

除了上述情況下小鼠NGAL的表達(dá)外，在SV40或多瘤病毒感染后，小鼠腎臟細(xì)胞中NGAL會(huì)發(fā)生早期且顯著的上調(diào)，這實(shí)際上是揭示NGAL存在及其在受損腎細(xì)胞中早期反應(yīng)的證據(jù)多年后，這一發(fā)現(xiàn)被擴(kuò)展到腎缺血后和腎毒性損傷的研究中。在腎缺血后早期的小鼠腎臟中，檢測(cè)到NGAL mRNA和蛋白水平的顯著上調(diào)，主要發(fā)生在近端腎小管細(xì)胞中；并且通過Western blotting技術(shù)，在缺血及順鉑誘導(dǎo)的腎毒性損傷后的小鼠尿液中，可以輕易檢測(cè)到NGAL蛋白的升高。

研究還發(fā)現(xiàn)，在糖尿病腎病和梗阻性腎病的小鼠模型中，尿液中NGAL水平也出現(xiàn)升高。然而，關(guān)于小鼠尿液、血漿或血清中NGAL水平的定量數(shù)據(jù)仍較為缺乏，無論是基礎(chǔ)狀態(tài)下的水平還是腎損傷后的變化。大多數(shù)分析都采用了Western blotting方法，該方法除了在急性期反應(yīng)誘導(dǎo)后13，通常無法在血清中檢測(cè)到NGAL。

盡管如此，尿液中NGAL的測(cè)定似乎可能成為評(píng)估小鼠腎損傷、腎毒性及其他腎病模型的一個(gè)便捷的實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)指標(biāo)。

產(chǎn)品信息：

檢測(cè)原理：

該檢測(cè)方法是一種夾心ELISA法，在包被有大鼠抗小鼠NGAL單克隆抗體的微孔中進(jìn)行。結(jié)合上的NGAL通過另一種生物素標(biāo)記的大鼠單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)，并使用辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素和顯色底物來完成測(cè)定。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1.急性腎損傷（AKI）研究：在缺血、缺氧或藥物（如順鉑）誘導(dǎo)的小鼠模型中，早期檢測(cè)尿液或血液中的NGAL，比肌酐更早反映腎小管損傷。

2.藥物腎毒性評(píng)估：在臨床前藥物篩選中，通過監(jiān)測(cè)尿液中NGAL水平的變化，評(píng)價(jià)候選化合物的腎臟安全性。

3.慢性腎病（CKD）機(jī)制研究：用于糖尿病腎病、梗阻性腎病等慢性模型中，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)生物標(biāo)志物，評(píng)估疾病進(jìn)展及干預(yù)效果。

4.炎癥與應(yīng)激反應(yīng)研究：作為一種1型急性期蛋白，用于研究炎癥刺激（如LPS、TNF-α）下，肝細(xì)胞或其他細(xì)胞中NGAL的表達(dá)調(diào)控。

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