豬NGAL檢測試劑盒

Pig NGAL ELISA Kit

簡介：

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL，neutrophil gelatinase-associated lipocalin）屬于脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族。該家族為一類小分子分泌型蛋白，其特征在于：

1）可在由β- 折疊片形成的結(jié)構(gòu)保守疏水口袋中結(jié)合小分子疏水性物質(zhì)；2）可與特異性細(xì)胞表面受體結(jié)合；3）可形成大分子復(fù)合物。NGAL 具有多種別名，其中應(yīng)用廣泛的是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 2（LCN2）；近年來也使用載鐵蛋白（siderocalin）這一名稱，以體現(xiàn) NGAL 能夠結(jié)合細(xì)菌鐵載體的特性 。由于 NGAL 在小鼠中被報(bào)道為癌基因 24p3，因此在其他物種中該名稱仍偶爾被用來指代 NGAL。根據(jù)豬（Sus scrofa）1 號(hào)染色體基因組測序結(jié)果，NCBI 參考序列 XM_001927681 顯示：豬 NGAL 由179 個(gè)氨基酸殘基組成，為單一二硫鍵連接的多肽鏈，理論分子量 20.35 kDa。與其他哺乳動(dòng)物 NGAL 類似，其糖基化修飾會(huì)使 SDS?PAGE 電泳中的表觀分子量提高至約 24–25 kDa。位于第 65 位殘基的 N?糖基化位點(diǎn)結(jié)構(gòu)完整，且在目前已知的所有胎盤哺乳動(dòng)物 NGAL 序列中均高度保守。

    由于豬NGAL尚未被分離純化，且目前缺乏用于檢測或定量的特異性抗體及免疫化學(xué)方法，因此尚未見關(guān)于該蛋白在豬體內(nèi)生理或病理功能的公開數(shù)據(jù)。但可以推測，豬NGAL在生物合成、定位及釋放等特性上可能與其他物種的同源蛋白存在相似性。本試劑盒的研發(fā)正是為了將NGAL研究及其作為標(biāo)記分子（特別是腎損傷標(biāo)志物）的應(yīng)用拓展至豬。以下將簡述其他哺乳動(dòng)物NGAL的部分病理生理特征，因?yàn)樨i可能出現(xiàn)相似特征。

與其他哺乳動(dòng)物NGAL類似，豬NGAL在某些情況下可能與基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）共表達(dá)并形成復(fù)合物。研究亦可能證實(shí)豬NGAL可形成同源二聚體及高級寡聚體。需特別指出的是，豬NGAL雖不似人源同源物具備形成分子間二硫鍵的第三個(gè)半胱氨酸殘基（該特征與其他所有已知哺乳動(dòng)物NGAL一致），但檢測到的任何復(fù)合物形成至少初期可能依賴于非共價(jià)作用力。

在其他哺乳動(dòng)物中，NGAL表達(dá)于中性粒細(xì)胞多形核白細(xì)胞，并在子宮、乳腺、肺、脾臟、陰道及附睪等器官組織的上皮細(xì)胞中存在較低基礎(chǔ)水平表達(dá)。胚胎發(fā)育階段及多種刺激應(yīng)答條件下，其他細(xì)胞類型也可能表達(dá)NGAL，包括特定腎細(xì)胞、LPS刺激的巨噬細(xì)胞、地塞米松誘導(dǎo)的L細(xì)胞?以及堿性成纖維細(xì)胞生長因子刺激的成纖維細(xì)胞。在小鼠模型中，24p3作為I型急性期蛋白，可在體內(nèi)松節(jié)油刺激模型或體外TNF-α/地塞米松誘導(dǎo)下由肝細(xì)胞分泌。

病理狀態(tài)下，NGAL可能因活化中性粒細(xì)胞或上皮細(xì)胞釋放而在細(xì)菌感染時(shí)中度升高；在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、病變心肌及某些上皮源性腫瘤（如乳腺癌、胃腸道癌、尿路上皮癌）中亦可出現(xiàn)中度表達(dá)上調(diào)。

產(chǎn)品信息：

檢測原理：

本檢測采用夾心ELISA法，在包被有抗豬NGAL小鼠單克隆抗體的微孔板中進(jìn)行。結(jié)合后的NGAL通過生物素標(biāo)記的另一株小鼠單克隆抗體進(jìn)行檢測，并使用辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素及顯色底物完成反應(yīng)顯色。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1.急性腎損傷（AKI）模型研究：在豬腎臟缺血再灌注、藥物腎毒性等模型中，用于早期檢測和定量評估腎損傷程度 。

2.腎臟疾病生物標(biāo)志物探索：定量檢測豬尿液、血漿或血清中的NGAL濃度，為獸醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)提供研究數(shù)據(jù) 。

3.全身性炎癥與感染研究：用于檢測細(xì)菌感染等引起的炎癥反應(yīng)中NGAL的水平變化。

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